Бактериологическое исследование. Один из самых эффективных методов для диагностики половых инфекций — бактериологический посев

Бактериологические исследования – одни из популярнейших способов проверки разнообразных биологических жидкостей. Если подразумевается посев крови, то речь идет об анализе, помогающем определить бактериальные инфекции в человеческом организме. Бак посев требуется тогда, когда по анализу крови обычного порядка невозможно определить присутствие бактериемии. Бак посев предполагает забор материала и дальнейшее помещение в питательную среду, в которой присутствуют компоненты, позволяющие бактериям очень быстро размножаться.

Бактериологическое исследование крови предполагает предварительное выращивание культур в питательной среде. Поэтому врачи называют такие анализы культуральные исследования. Когда по прошествии нескольких дней бактерии начинают активно расти, получившуюся пробу отправляют на микроскопическое исследование. После того как культуры выросли достаточно, бактериурию определить труда уже не составляет. Однако это еще не все анализы. В таком случае дается только предварительная оценка. Чтобы идентифицировать бактерии более точно, выполняется следующий этап. Это бак посев образцов жидкой культуры в плотную среду в чашке Петри. Такое исследование помогает определить растущие бактериальные колонии. С их образцами уже можно проводить химические тесты, которые позволят более точно определить окончательный вид микроорганизма.

Все эти этапы являются подготовительными для проверки видов бактерий на чувствительность к разного рода антибиотикам. Это требуется для поиска наиболее подходящего для борьбы с инфекцией лекарства.

При выполнении бактериологического анализа крови можно обнаружить:

• стафилококков;
• стрептококков;
• энтеробактерии;
• грибки дрожжей.

Анализы крови при бактериальной инфекции в обязательном порядке проводятся пациентам со сниженным иммунитетом. К примеру, у лиц, обладающих ВИЧ, нередко обнаруживаются бактерии туберкулеза. Такое обследование помогает исключить получение неправильных результатов.

При заболеваниях инфекционной направленности у бактерий и микроорганизмов есть возможность проникнуть в кровяной ток, попасть в другие организменные системы, которые расположены неподалеку от самого очага. Если расшифровка крови на посев демонстрирует положительный результат, значит, инфекция зашла уже далеко. Это может сопровождаться повышением температуры, повышением лейкоцитов, перебоями в сердечной работе.

Особенности анализа

Бактериологический метод исследования, как и любая другая проверка, имеет свои плюсы и минусы. Среди плюсов выделяется высокая специфичность метода. Это позволяет избежать перекрестных ложных реакций. Для исследования подойдет любая биологическая жидкость. Может выполняться посев мазка, анализ мочи, крови и т.д. Лечебной целью является определение чувствительности выявленного микроба к тому или иному средству лечебной направленности. Это позволяет быстро уничтожить микроорганизмы, не тратя время на напрасное лечение.

Безусловно, не обходится и без минусов. Среди них можно отметить то, что бакпосев требует времени на выполнение. Обычно исследуемый материл находится в лаборатории не менее недели. К забору материала предъявляются серьезные требования, важно соблюсти каждое правило забора материала для бактериологического исследований. Кроме этого, персонал лаборатории должен иметь специальную квалификацию.

Обычно результаты бактериологического исследования получаются по образцам любых биологических жидкостей человека: от слизи с носоглотки, до спинномозговой жидкости. Посев крови, как и любой другой жидкости особой подготовки к анализу не предполагает. За два-три дня рекомендуется отказаться от жирного, жареного, не принимать алкоголь. Если сдаваться будет кровь, то минимум за 12 часов нужно совершить последний прием пищи. Такая особенность сдачи именуется строго натощак. За несколько часов до сдачи запрещается курить.

Кровь на посев, когда речь идет о стерильности, берется несколько раз в определенный временной промежуток. Связано это с тем, что не всегда можно добиться заражения питательной среды по одной пробе, поэтому результативным однократный забор не считается. Говорить о том, что провокатором той или иной инфекции стал определенный микроорганизм можно только после того, как будет проведено серийное исследование, как минимум, два раза. В результате неоднократного исследования должны выявляться предполагаемые бактерии. Можно выполнить одновременную проверку не только крови, но и других биологических жидкостей.

Забирать кровь нужно при максимально высокой температуре. При этом предварительное антибиотическое лечение может смазать результаты. В крайнем случае, должно пройти не менее суток с последнего антибиотического приема. Забор крови выполняется в утренние часы.

После забора выполняется посев в питательную среду, которая благоприятна для роста бактерий. Выдерживаются такие образцы при температуре 37-38 градусов в течение нескольких суток.

На сегодняшний день выполняется два вида посева. Речь идет о посеве, позволяющем определить чувствительность к основному антибиотическому спектру и о посеве с выявлением чувствительности к широкому спектру медикаментов. Обычно на получение первых результатов требуется не менее трех суток. Порой исследование растягивается до двух недель.

Вирусная инфекция

Когда в организм попадает вирус, диагностировать наличие или отсутствие можно с помощью общего анализа крови. Обычно определить присутствие инфекции может без проблем даже сам пациент, получив на руки результаты анализов. Однако это не значит, что нужно исключать консультацию со специалистом.

Чтобы определить, что именно стало причиной инфекции вирус или бактерии, нужно внимательно ознакомиться с полученными данными. Дело в том, что структурный кровяной состав меняется по-разному, в зависимости от того, причиной заражения стал вирус или бактерии.

Если причиной плохого самочувствия стал вирус, то лейкоциты будут в норме или даже чуть ниже, в самых редких случаях наблюдается некоторое увеличение. Лимфоциты представлены выше нормы, как и моноциты. На нейтрофилы вирус действует угнетающим образом, поэтому количество их снижается. Показатель СОЭ обычно остается в норме или повышается совсем незначительно.

Даже если все описанное совпадает с вашим анализом, важно учесть и симптоматику, которая у вас проявилась. Для вирусной инфекции характерен меньший инкубационный период. Обычно он не составляет более пяти дней. При этом самостоятельная постановка диагноза должна быть исключена, поскольку порой проявление бактерий происходит на фоне развития вируса, а с определением такой этиологии не будет проблемы только у специалиста.

Разные образцы

При сборе мочи на бактериологическое исследование, предполагается сбор утренней мочи, ее средней порции. Предварительно выполняется туалет наружных половых органов. Забор осуществляется в стерильную посуду, вмещающую 10-15 мл. Доставить анализ нужно в лабораторию в течение не более чем двух часов.

Если вам предстоит исследование мазка из зева и носа, то утром запрещено чистить зубы, полоскать рот и нос с использованием дезинфицирующих растворов. Запрещено употреблять пищу и воду. Если требуется выполнить бакпосев кала, то забор испражнений осуществляется из утреннего стула с помощью стерильной лопаточки в стерильную посуду, объем анализа должен составлять 15-30 грамм. Важно чтобы в пробу не попала моча.

Доставить анализ нужно в течение пяти часов. Хранить анализ ночью или замораживать запрещается. Сбор кала с помощью клизмы и слабительного тоже должен быть исключен.

Если исследовать нужно мокроту, то сбор выполняется утром натощак в стерильный контейнер во время кашельного приступа вместе со слизью. Перед сбором допустимо почистить зубы, однако для полоскания должна использоваться только кипяченая вода. В лабораторию анализ доставляется в течение часа.

Сбор грудного молока выполняется после предварительных гигиенических процедур. Область около сосков должна быть обработана тампоном, который смачивается 70ти процентным этиловым спиртом. Первые 15 мл использовать для сдачи нельзя. Из средней порции сцеживается 5 мл. Доставка анализа должна выполняться в течение двух часов.

Если выполняется анализ отделяемого с половых органов, то для женщин действует запрет на сдачу в период менструации, должна пройти хотя бы неделя после нее. Если ранее проводился антибиотический курс, то по завершении должен пройти месяц. Предварительно выполняется туалет наружных половых органов. Желательно не мочиться в течение двух часов. Мужчинам рекомендуется растянуть время отсутствия похода в туалет до пяти часов.

Бактериологический посев осуществляется для изучения биологических и физико-химических свойств бактерий, которые используются для диагностики инфекционных заболеваний на основе микробов одного вида. Современные технологии позволяют получить необходимые бактерии с помощью и , которые, однако, могут показать ложные результаты, не определив возбудителя инфекции.

В зависимости от среды обитания микроорганизмы и бактерии имеют возможность размножаться. Для обеспечения интенсивно размножения бактериям необходимы температурный режим и пищевые добавки.

Условия для размножения микроорганизмов

Бактерии способны к размножению только в определенной рН среде, которая обеспечивает необходимые параметры влажности, кислотности, восстановительных параметров, вязкости и осмотических свойств . Определенный набор бактерий питаются и существуют в определенной среде, которая может быть простой, сложной, мягкой, твердой, универсальной или индивидуальной . Универсальная среда обеспечивает необходимыми условиями многие виды микроорганизмов, в то время как индивидуальная среда обеспечивает жизнедеятельность определенного вида бактерий.

Виды бактерий

Бактерии и микроорганизмы, живущие на коже и слизистых оболочках человеческого организма, являются интересной сферой изучения и диагностики болезней и используются во многих отраслях медицины. Бактерии и микроорганизмы, живущие в слизистых оболочках и на коже человека, распределяются по представителю:

1. Постоянный обитатель организма, не несущий угрозы для здоровья и не способствующий развитию заболеваний. Однако исчезновение этих бактерий приводит к появлению и развитию заболеваний. Примерами заболеваний может послужить дисбактериоз в кишечнике или бактериальный вагиноз. Данные заболевания вызваны нарушениями нормальной микрофлоры и исчезновением необходимых бактерий;
2. Условно-патогенная микрофлора – является причиной развития болезней при высоком показателе условных патогенных микробов, размножающихся при иммунодефиците;
3. Патогенные микробы, отсутствующие в здоровом человеческом организме . Попадая в среду размножения, провоцируют заболевания и дают начало инфекционным процессам. являются возбудителями наиболее опасных заболеваний, например, чумы, оспы, холеры и венерических заболеваний.

Назначение бактериологических посевов

Для выявления инфекционных процессов, вызванных микробами и микроорганизмами, проводятся бактериологические посевы, способные определить вид микроорганизма и предотвратить размножение бактерий. В зависимости от среды обитания бактерий, методы посевов также имеют отличия, позволяющие получить чистую культуру микроорганизмов, не содержащую бактерии другого вида.

Обследуя пациента, которого тревожат те или иные проблемы со здоровьем, доктор назначает бактериологический посев, который может подтвердить предположение доктора о проникновении патогенного возбудителя, нарушение нормальной микрофлоры или чрезмерное размножение . Результаты анализа показывают:

• вид возбудителя и его название на латинском языке;
• концентрацию и количество бактерий;
• патогенность микроорганизма.

При исследовании некоторых биологических материалов основной единицей измерения является КОЕ\мл , которая сообщает о количестве колониеобразующих единиц бактерий на миллилитр биологического материала. При анализе на патогенные микробы результаты исследования могут оказаться положительными или отрицательными. Получая анализы исследования, сообщающие о наличии или превышающие показатель колониеобразующих единиц, назначается повторный анализ, подтверждение которого информирует об инфекционном процессе в организме и требует лечения.

При исследованиях патогенного микроорганизма, выявленного во флоре, проводятся дополнительные анализы – посев микрофлоры , показывающие чувствительность организма к антибиотикам, которые могут устранить . Действующие препараты, к которым микробы проявляют чувствительность, обозначаются буквой S, антибиотики неспособные устранить заболевание – R.

Данное исследование помогает точно определить вид антибиотика, способного бороться с патогенным заболеванием без нанесения вреда организму.

Подготовка к бактериологическому посеву

Исследованию может подлежать любой биологический материал. Основным материалом для анализа служат:

• кожа;
• кровь;
• сперма;
• слизистая оболочка ротовой полости;
• слизистая оболочка дыхательных путей;
• слизистая мочеиспускательных путей;
• сок желудочно-кишечного тракта;
• органы слуха, зрения, обоняния.

Бактериологический посев требует подготовки и соблюдения определенных правил. Анализ крови совершается врачами и не требует серьезной подготовки, а назначенный урологом или гинекологом анализ мочи или мазок слизистой половых органов, требует выполнения правил перед анализом. Анализ мочи у женщин может захватить непатогенные кокки, но при этом моча остается стерильной, мужской анализ мочи может захватить непатогенные бактерии, стафилококки, дифтероиды. Чтобы увеличить качество исследуемого биологического материла, и избежать повторного анализа, необходимо обеспечить максимальную стерильность.

1. Перед анализом необходимо уделить время гигиене половых органов;
2. Женщинам, которым необходимо сдать мочу на анализ, следует закрыть вход во влагалище ватным тампоном;
3. Анализ проводится на средней порции мочи, составляющей примерно 10 мл;
4. Время обработки мочи, взятой на посев, - не более 2 часов.

При посеве из прямой кишки, уретры, влагалища, шейки матки процедура проходит в медицинских учреждениях, однако требует выполнения одного правила перед анализом: накануне посева запрещено спринцевание, подмывание и использование любых антисептических средств .

Время исследования и анализа биологического материала зависит от самого материала, таким образом, период ожидания результата может занять от 3 до 14 дней . Стоимость анализа также зависит от вида посева, но в некоторых случаях в поликлинике по назначению врача и в женской консультации посев осуществляется бесплатно. Для беременных женщин бактериологический посев является обязательной процедурой и должен проводиться дважды, второй раз включает посев слизистой оболочки носа и рта.

Интересные факты о бактериологическом посеве

Патогенные гонококки, которые можно выявить путем бактериологического посева, осваиваются в организме на третий день, провоцируя гонорею, постепенно захватывающую весь организм. Для выявления болезни проводятся посев, культивирование, микроскопия и другие анализы.

Иногда в мазке половых путей при анализе выявляются диплококки - парные «кофейные зерна». Данная находка не указывает на венерическое заболевание, оно появляется в постменопаузе.

Посев мочи назначается только в необходимом случае, так как требует серьезной и трудной работы, поэтому врачи часто избегают анализа мочи.

Большое количество анализов требует , которую довольно тяжело диагностировать. Инфекцию определяют с помощью посева, затем культивируют, изучая чувствительность к антибиотикам и различным терапиям.

Беременность предоставляет уникальные возможности для маскировки микроорганизмов. Поэтому бактериологические посевы являются обязательной программой для беременных женщин.

Все бактериологические посевы и анализы – это безболезненные процедуры, которые, однако, помогают выявить болезнь и найти средство для ее устранения.

Методы проведения бактериологического посева

Для выявления микроорганизмов используются приспособления, позволяющие перенести материал на среду в стерильных условиях. Процедура осуществляется бактериальной петлей , пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой . Приспособления, известные медицинским работникам с XIX века, прошли через изменения и усовершенствования, появились улучшенные стерильные способы использования инструментов благодаря одноразовым пластиковым приспособлениям.

Процедура проводится в стерильных условиях рабочей зоны, обработанной дезинфицирующими средствами. Медработники используют стерильные перчатки, которые, как одежда и рабочая зона, должны быть обработанными средствами, не мешающими выделению изолированных штаммов. Время посева должно быть минимальным, но процедура требует внимательность и аккуратности.

Выделение штаммов и исследование чистых культур

Из-за особенностей некоторых микроорганизмов, которые требуют индивидуального подхода и изучения, выделение штаммов проходит различными способами, подходящими под исследование бактерий определённых видов. Таким образом, мазок может помещаться в определённую среду, которую через некоторое время следует сменить другой средой. В некоторых случаях жидкость следует центрифугировать, а затем изучить осадок с помощью посева.

Бактериологический посев позволяет определить размер, форму, тип бактерии, наличие жгутиков, спор или капсул на теле микроорганизма, а также определить свойства бактерий к окрашиванию. Данные исследования информируют медицинского работника, делающего анализ, о наличии заболеваний, патогенных бактерий, и возможностях выделения отдельной клетки, что делает анализ посева важным этапом научных целях для изучения генетических исследований.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче , и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают ;
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов , которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов , которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
  1. дифтероидами;
  2. стафилококками;
  3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала , перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку , окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14 , поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный (обычно это Candida albicans), и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает , приносящая большой вред не только при беременности . Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1: 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном . Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

С помощью бактериологического исследования изучаются свойства разнообразных бактерий, благодаря чему устанавливается правильный микробиологический диагноз. С помощью этого метода исследования можно определить заболевание на ранних стадиях его развития.

Для того чтобы провести бактериологическое исследование необходимо взять бакпосев из зева или носа. У представителей мужского пола могут брать сперму на проведение анализа, с помощью которого выявляют трихомонады. Данное исследование не только способно выявлять концентрацию патогенных микроорганизмов в материале, который забирается для анализа. С помощью этого исследования можно исследовать отделяемое половых органов представителей мужского и женского пола, а также ликвоту, кровь и мокроту.

Сырье для бактериологического анализа может браться из:

• Анального отверстия (калл).
• Из слизистых оболочек рота, носа и половых органов (зев).
• Из ран человека.

Благодаря высокому уровню эффективности данного исследования обеспечивается благодаря обнаружению видов грибков и бактерий.

Определение вирусов производится в зависимости от сложности их итиологии. Бактериологическое исследование проводится по назначению врача при подозрении на какое-либо заболевание. Отдельные виды этого исследования производятся регулярно (например, исследование на яйцеглисты производится один раз в год).

Посевы бактериальных культур производятся с помощью бактериологической петли или пастеровской пипетки.

Перед проведением анализа бактериологическая петля поддается стерилизации методом прокаливания пламенем.После этого петля проходит процесс остужения методом прикосновения к незасеянному ангару. Далее этот инструмент ополаскивается в специальной стерильной жидкости.

В том случае, если для исследования используется пастеровская пипетка, то ее кончик необходимо обломать с помощью пинцета. Далее пипетку некоторое время удерживают над пламенем.

Бакпосевы характеризуются использованием жидких и твердых сред. Культура бактерий растирается о поверхность агара. С этой целью используется петля. В том случае, если посев производится в агаровом или желатиновом столбике, то питательная среда прокалывается острой иглой или петлей. В том случае, если производится посев в жидкую среду, то необходимо смотреть, чтобы края пробирки не смачивались этой жидкостью. Если посевы берутся в пробирки, то их нельзя оставлять в открытом положении длительное время, так как это может негативно повлиять на результат исследования.

После того, как посев поместили в пробирку, ее сразу же подписывают. Далее производится идентификация бактериологической культуры. С этой целью изучают биохимические и физиологические свойства бактерий. Очень часто при данном исследовании используется серологический способ идентификации. Высокоэффективным также является биологический метод идентификации. Он заключается в заражении животных материалом, который исследуется. Для того чтобы выделить чистые культуры, применяется метод идентификации.

Виды метода идентификации:

1. Механический метод идентификации заключается в растирании по поверхности плотной среды исследуемого материала. Для выполнения этого действия чаще всего используется бактериальная петля или стерильный шпатель.
2. При использовании биологического метода идентификации необходимо создать такую среду, которая будет наиболее благотворна для развития бактерий.

Независимо от метода исследования необходимо использовать только стерильные и термически обработанные инструменты. Благодаря этому можно получить правильные и точные результаты исследования, что даст возможность поставить правильный диагноз и назначить рациональное лечение.

Исследование бактерий имеет большое практическое значение для человека. На сегодняшний день открыто большое количество прокариот, которые отличаются друг от друга по патогенности, области распространения, форме, размерам, количеству жгутиков и другим параметрам. Чтобы детально изучить данный штамм, применяется бактериологический метод исследования.

Какие существуют методы клеток?

Чтобы определить, являются ли бактерии патогенными, проводят исследование культуры различными способами. Среди них:

1. Бактериоскопический метод.

2. Бактериологический метод.

3. Биологический метод.

Бактериоскопический и бактериологический основаны непосредственно на работе с клетками прокариот, когда биологический анализ требуется для изучения влияния таких клеток на живой организм подопытных животных. По степени проявления тех или иных признаков заболевания ученый может сделать вывод о наличии или отсутствии патогенных бактерий в пробе, а также естественно их размножить в организме животного для получения их культуры и использования в других работах.

Бактериологический метод исследования отличается от бактериоскопического. В первом для анализа используется специально подготовленная культура живых прокариот, когда во втором проводится работа с мертвыми или живыми клетками на предметном стекле.

Этапы бактериологического метода исследования. Микробиология

Принцип изучения свойств бактериальной культуры может пригодиться как для ученых-микробиологов, которые поставили цель исследовать прокариотические клетки, так и для лаборантов, задача которых заключается в установлении патогенности или непатогенности бактерий, а затем диагноза пациента.

Методика изучения бактерий делится на три этапа:

1. Выделение бактерий из первоначальной пробы.

2. Высевание бактерий и выращивание изучение ее свойств.

3. Детальное исследование бактериальных клеток.

Первый этап

Проба, или мазок, берется со свободной поверхности среды или у пациента. Таким образом мы получаем «коктейль» из множества видов бактерий, которые должны высеять на питательную среду. Иногда появляется возможность выделить сразу необходимые бактерии, зная их очаги распространения в организме.

Через двое-трое суток отбираются нужные колонии и высеваются на твердые среды чашек Петри с помочью стерильной петли. Во множестве лабораторий работают с пробирками, где может находиться твердая или жидкая питательная среда. Так и проводится бактериологический метод исследования в микробиологии.

Второй этап

После получения отдельных колоний бактерий проводится непосредственный макро- и микроанализ. Измеряются все параметры колоний, определяется цвет и форма каждой из них. Нередко проводится подсчет колоний на чашке Петри, а затем в исходном материале. Это имеет значение при анализе патогенных бактерий, от числа которых зависит степень заболевания.

Бактериологический метод исследования, 2 этап которого заключается в изучении отдельных колоний микроорганизмов, может быть сопряжен с биологическим способом анализа бактерий. Еще одна цель работы на этом этапе - увеличить количество исходного материала. Это можно сделать на питательной среде, а можно провести эксперимент в естественных условиях на живых подопытных организмах. Патогенные бактерии будут размножаться, и в результате кровь будет содержать миллионы клеток прокариот. Из взятой крови легко приготовить необходимый рабочий материал бактерий.

Третий этап

Самая важная часть исследования - это определение морфологических, биохимических, токсигенных и антигенных свойств культуры бактерий. Работа ведется с заранее «очищенными» культурами на питательной среде, а также с препаратами (зачастую окрашенными) под микроскопом.

Установить принадлежность патогенных или условно-патогенных бактерий к той или иной систематической группе, а также определить их устойчивость к лекарствам позволяет бактериологический метод исследования. 3 этап - антибиотики, т. е. анализ поведения клеток бактерий в условиях содержания лекарственных препаратов в окружающей среде.

Исследование устойчивости культуры к антибиотику имеет важное практическое значение, когда необходимо прописать для конкретного пациента необходимые, а главное, действенные препараты. Здесь и может помочь бактериологический метод исследования.

Что такое питательная среда?

Для развития и размножения бактерии должны находиться в заранее подготовленных По консистенции они могут быть жидкие или твердые, а по происхождению - растительные или животные.

Основные требования к питательным средам:

1. Стерильность.

2. Максимальная прозрачность.

3. Оптимальные показатели кислотности, активности воды и других биологических величин.

Получение изолированных колоний

1. Метод Дригальского. Он заключается в том, что на бактериальную петлю наносится мазок с различными видами микроорганизмов. Этой петлей проводят по первой чашке Петри с питательной средой. Далее, не меняя петлю, методом остаточного материала проводят по второй и третьей чашкам Петри. Так, на последних образцах колонии бактерии будут засеваться не слишком плотно, тем самым упрощается возможность найти необходимые для работы бактерии.

2. Метод Коха. В нем используются пробирки с расплавленной питательной средой. Туда помещается петля или пипетка с мазком бактерий, после чего содержимое пробирки выливается на специальную пластинку. Агар (или желатин) застывает через какое-то время, а в его толще легко обнаружить нужные колонии клеток. Важно перед началом работы развести смесь бактерий в пробирках, чтобы концентрация микроорганизмов не была очень большой.

Этапы которого основаны на выделении нужной культуры бактерий, не обходится без этих двух способов нахождения изолированных колоний.

Антибиотикограмма

Визуально реакцию бактерий на препараты можно заметить двумя практическими способами:

1. Метод бумажных дисков.

2. Разведение бактерий и антибиотика в жидкостной среде.

Метод бумажных дисков требует наличия культуры микроорганизмов, которые были выращены на твердой питательной среде. На такую среду кладут несколько бумажек округлой формы, пропитанных антибиотиками. Если препарат успешно справляется с нейтрализацией бактериальных клеток, после такой обработки останется участок, лишенный колоний. Если же реакция на антибиотик отрицательная, бактерии выживут.

В случае использования жидкой питательной среды сперва готовят несколько пробирок с культурой бактерий разных степеней разведения. В эти пробирки добавляют антибиотики, и в течение суток наблюдают за процессом взаимодействия вещества и микроорганизмов. В конечном итоге получается качественная антибиотикограмма, по которой можно судить об эффективности препарата для данной культуры.

Основные задачи анализа

Здесь перечислены по пунктам цели и этапы бактериологического метода исследования.

1. Получить исходный материал, который будет использоваться для выделения колоний бактерий. Это может быть мазок с поверхности любого предмета, слизистой оболочки или полости органа человека, анализ крови.

2. на твердой питательной среде. Через 24-48 часов на чашке Петри можно обнаружить колонии бактерий разных видов. Отбираем по морфологическим и/или биохимическим критериям нужную и проводим уже с ней дальнейшую работу.

3. Размножение полученной культуры. Бактериологический метод исследования может опираться на механический или биологический способ увеличения численности культуры бактерии. В первом случае ведется работа с твердыми или жидкими питательными средами, на которых в термостате размножаются бактерии и образуют новые колонии. Биологический способ требует естественных условий увеличения численности бактерий, поэтому здесь микроорганизмами заражается подопытное животное. Через несколько суток в пробе крови или мазке можно обнаружить множество прокариот.

4. Работа с очищенной культурой. Чтобы определить систематическое положение бактерий, а также их принадлежность к возбудителям заболеваний, необходимо провести тщательный анализ клеток по морфологическим и биохимическим признакам. При исследовании патогенных групп микроорганизмов важно знать, насколько эффективно действие антибиотиков.

Это была общая характеристика бактериологического метода исследования.

Особенности проведения анализа

Главное правило проведения бактериологического исследования - это максимальная стерильность. Если идет работа с пробирками, посевы и пересевы бактерий должны проводиться только над нагретой спиртовкой.

Все этапы бактериологического метода исследования требуют использования специальной петли или пастеровской пипетки. Оба инструмента должны быть предварительно обработаны в пламени спиртовки. Что касается пастеровской пипетки, то тут перед термической стерилизацией необходимо отломать кончик пипетки пинцетом.

Техника посева бактерий тоже имеет свои особенности. Во-первых, при посеве на твердые среды проводят бактериальной петлей по поверхности агара. Петля, конечно же, уже должна иметь на поверхности образец микроорганизмов. Также практикуется посев внутрь питательной среды, и в этом случае петля или пипетка должны достичь дна чашки Петри.

При работе с жидкими средами используются пробирки. Здесь важно следить, чтобы жидкости не касались краев лабораторной посуды или пробки, а используемые инструменты (пипетка, петля) не дотрагивались до посторонних предметов и поверхностей.

Значение биологического метода исследования

Анализ пробы бактерий имеет свое практическое применение. Прежде всего бактериологический метод исследования может использоваться в медицине. К примеру, необходимо изучить микрофлору больного, чтобы установить правильный диагноз, а также выработать правильный ход лечения. Здесь помогает антибиотикограмма, которая покажет активность лекарственных препаратов против возбудителя заболеваний.

Анализ бактерий используется в лаборатории для определения таких опасных заболеваний, как туберкулез, возвратный тиф или гонорея. Также он применяется для изучения бактериального состава миндалин, полостей органов.

Бактериологический метод исследования можно использовать для определения загрязненности среды. По данным о количественном и качественном составе мазка с поверхности какого-либо предмета определяется степень заселенности данной среды микроорганизмами.